غربالگری و بررسی فعالیت آنزیمی آمیلاز از باكتری های مولد
تاریخ دفاع
مقطع تحصیلی
كارشناسی ارشد
گروه آموزشی
بیوتكنولوژی كشاورزی
استاد
ابوذر سورنی
نشاسته بعنوان منبع انرژی یکی از اجزای اصلی جیره غذایی طیور است که توسط اکثر گیاهان سبز تولید شده و بیش از 70-80 درصد دانههای غلات را تشکیل میدهد. طیور در دستگاه گوارش خود آنزیم¬هایی تولید می¬کنند که نشاسته را به قندهای ساده تر به منظور سهولت جذب در روده تجزیه می¬کنند. آلفا آمیلاز یکی از آنزیم¬هایی است که مسئول تجزیه مولکول¬های پیچیده نشاسته به قندهای ساده¬تر مانند مالتوز و گلوکز است. این تجزیه در نهایت باعث بهبود فرآیند جذب در روده طیور میشود، بدین معنی که برای دستیابی به رشد و عملکرد بهینه خوراک استفاده از آنزیم¬ها ضروری می¬باشد. آنزیم آلفا آمیلاز یک آنزیم آمیلولیتیک با کاربردی گسترده درصنایع مختلف میباشد که موجودات زنده، مخصوصا میکروارگانیسمها پتانسیل تولید این آنزیم را دارند. از جمله این میکروارگانیسمها، باکتریها میباشند که قادرند در زمان کمتر، تولید مثل و رشد بیشتری داشته باشند. لذا شناسایی سویه¬های مولد با پتانسیل بالای تولید آلفا آمیلاز و همچنین دستیابی به آنزیمی با ویژگی¬ها مطلوب دمایی و pH به منظور کاهش هزینه¬های تولید آنزیم در اولویت است. در این مطالعه 60 سویهی تولید کننده آنزیم آلفا آمیلاز از آب و خاک مناطق مختلف جدا شده و از نظر تولید آلفا آمیلاز، مورد غربالگری قرار گرفتند. بعد از ارزیابی¬های کمی و کیفی صورت گرفته نشان داده شد که 4 سویه (S1، S3، S4 و S5 ) توانایی بیشتری در تولید آلفا آمیلاز از خود نشان دادند. براساس منحنی استاندارد مالتوز و بیش¬ترین میانگین جذب اندازه-گیری شده، میانگین غلظت آنزیم برای سویه¬هایS1، S3، S4 و S5 به ترتیب 30918، 33717، 25183 و 23662 u/gr محاسبه شد. سویه S3 با توجه به فعالیت در گستره بیشتر دمایی و pH و تولید آنزیم با کارایی بیشتر، نسبت به دیگر سویهها عملکرد بهتری داشت. آلفا آمیلاز تولید شده، توسط سولفات آمونیوم خالص¬سازی و جرم مولکولی آنزیم براساس آنالیز ژل SDS-PAGE، 56000 دالتون تخمین زده شد. بررسی بیشتر سویه¬ها براساس توالی ژن 16S rRNAو rpoB نشان داد 3 سویه (S3, S4, S5) ، ارتباط نزدیکی با جنس و گونه باسیلوس سابتیلیس دارند.
کلمات کلیدی: آلفا آمیلاز، نشاسته، Bacillus subtilis، پایداری دمایی، غربالگری باکتری

