اثر متیل جاسمونات و سالیسیلیك اسید بر تجمع سیلی مارین و بیان برخی از ژن های مسیر بیوسنتز آن در كشت سوسپانسیون گیاه مارتیغال (Silybum marianum)
تاریخ دفاع
مقطع تحصیلی
كارشناسی ارشد
گروه آموزشی
بیوتكنولوژی كشاورزی
استاد
مجید طالبی
خارمریم یا مارتیغال گیاهی از خانواده Asteraceae است. این گیاه به عنوان یکی از گیاهان داروئی و روغنی بسیار مهم در جهان است. اهمیت این گیاه به دلیل داشتن نوعی فلاونولیگنان به¬نام سیلی¬مارین است که دارای اثر داروئی برای مداوای بیماری¬های معده، روده، طاعون و همچنین با اثرات آنتی اکسیدانی سبب حفاظت از سلول¬های عصبی، لوزالمعده و کلیه¬ها می¬شود. اثر داروئی این گیاه به¬صورت درمان خاص برای بیماری¬های کبدی مورد استفاده قرار می¬گیرد. استفاده از کشت بافت و سلول گیاهی ابزاری قدرتمند برای تولید متابولیت¬های ثانویه محسوب می¬شود. در این پژوهش تلاش شد تا مقدار این متابولیت ثانویه در کشت سوسپانسیون با استفاده از الیسیتورهای متیل جاسمونات و سالیسیلیک اسید افزایش یابد. بدین منظور در ابتدا کالوس زائی با استفاده از قطعات برگی این گیاه تحت تیمار با غلظت¬های مختلف از تنظیم کننده¬های رشد کینتین، 4-D،2 و پیکلورام القا شد. بهترین کالوس¬ها از لحاظ صفات تعداد، وزن تر و مساحت در محیط حاوی 8/0 میلی گرم بر لیترکینیتن، 1/0 میلی گرم بر لیتر 4-D،2 و 2 میلی گرم بر لیتر پیکلورام به¬دست آمد. پس از بهینه سازی کشت سوسپانسیون با غلظت های مختلف از الیسیتور های متیل جاسمونات و سالیسیلیک اسید، طی زمان¬های شش ساعت، سه روز و شش روز نمونه برداری از سلول های در حال رشد انجام شد. اندازه گیری مقدار سیلی¬مارین با استفاده از تکنیک HPLC نشان داد بالاترین مقدار آن در غلظت¬های 100 میکرومولار متیل جاسمونات و 100 میکرومولار سالیسیلیک اسید حاصل شد. اندازه گیری بیان ژنهای PAL، CAD و CHI در مسیر بیوسنتز این ترکیب داروئی نیز نشان داد که بیشترین بیان در غلظت 100 میکرومولار متیل جاسمونات توسط ژن¬های PAL و CAD در روز سوم و ژن CHI در شش ساعت اول بوده است. همچنین بیشترین بیان در غلظت 100 میکرومولار سالیسیلیک اسید توسط ژن PAL در روز ششم، در ژن CAD شش ساعت اول و در ژن CHI روز سوم بوده است. در مجموع نتایج حاصل از این پژوهش نشان داد که می¬توان از الیسیتورهای متیل جاسمونات و سالیسیلیک اسید در کشت سوسپانسیون به¬منظور افزایش مقدار سیلی¬مارین در صنایع داروئی بهره برد.
کلمات کلیدی: خارمریم، سیلی مارین، کالوس، متیل جاسمونات، سالیسیلیک اسید، بیان ژن

