رفتن به محتوای اصلی
x
انكپسوله كردن فرم نوتركیب آنزیم سوپراكسید دیسموتاز گیاه حرا با آلژینات به منظور بررسی رهایش و پایداری آن در سیستم گوارشی شبیه سازی شده جوجه
تاریخ دفاع
مقطع تحصیلی
كارشناسی ارشد
گروه آموزشی
بیوتكنولوژی كشاورزی
استاد

آذر شاه پیری

سوپر اکسید دیسموتاز (SOD) یک آنزیم آنتی اکسیدان است که برای دفاع فیزیولوژیکی در حیوانات و گیاهان در برابر رادیکال های آزاد و گونه های اکسیژن واکنش پذیر (ROS) تولید شده از استرس های غیرزنده و زنده کارایی فراوانی دارد. مکمل سوپر اکسید دیسموتاز از گیاهان در رژیم غذایی پستانداران یک روش جدید از نظر بهبود سلامت در برابر شرایط پاتوژیک می باشد. رادیکال های آزاد و گونه های اکسیژن فعال اصطلاحات رایجی هستند که مربوط به پاتوفیزیولوژی سرطان، دیابت، سمیت کبدی، ارتروز و بسیاری از بیماری های شدید دیگر می شود (گونه های فعال اکسیژن) شبیه شمشیرهای دو لبه است که می تواند تکثیر سلولی را تنظیم کند یا منجر به آپوپتوز و مرگ سلولی می شود. حفظ تعادل در غلظت گونه های فعال اکسیژن درون سلولی و خارج سلولی مهم می باشد. هدف از این پژوهش و تحقیق انکپسوله کردن فرم توترکیب آنزیم سوپراکسید دیسموتاز (SOD) گیاه حرا با آلژینات به منظور بررسی رهایش و پایداری آن در سیستم گوارشی شبیه سازی شده جوجه می باشد. بدین منظور سویه R-AmSOD1 که قبلا با انتقال ژن کد کنند AmSOD1Am از گیاه حرا به باکتری E.coli (DE3) ساخته شده بود و قابلیت تولید آنزیم AmSOD1 را داشت در محیط مناسب کشت داده شد و پس از القا با IPTG این پروتئین تولید شد. با استفاده از کروماتوگرافی تمایلی این آنزیم خالص سازی شد و سپس به منظور حذف نمک ایمیدازول دیالیز صورت گرفت. از طرفی نانو ذره با سدیم آلژینات با غلظت (2 میلی گرم بر میلی لیتر) با حضور یون کلیسیم تولید شد. جهت بارگیری آنزیم فرایند تولید نانودره به همراه پروتئین خالص سازی شده صورت گرفت. به این ترتیب نانوذرات شاهد ( بدون بارگیری) و نانوذرات بارگیری شده تولید شد. با توجه به کم بودن مقدار آنزیم بارگیری شده با تغییراتی مانند تغییر در غلظت کلسیم مقدار آنزیم بارگیری شده حتی به 50 درصد نیز رسید. برای بررسی رهایش آنزیم از ورنال بافرکه عمدتا جهت سیستم شبیهسازی شده در مرغ مورد استفاده قرار می گیرد استفاده شد. این بافر در pH های مختلف تهیه گردید. مقدار رهایش در pH های اسیدی در حدود 3 الی 4 درصد بود در حالی که این مقدار در pH 5/7 به مقدار 20 درصد افزایش یافت. افزایش رهایش در pH 5/7 که مطابق با pH در روده جوجه می باشد نشان می دهد که نانوساختار به دست آمده به عنوان یک پوشش مناسب برای انکپسوله کردن پروتئین می باشد.این تحقیق مقدمه خوبی برای تحقیقات بعدی در خصوص استفاده از سوپر اکسید دیسموتاز به عنوان مکمل غذایی در جانوران فراهم می کند. کلمات کلیدی: نانو ذره آلژینات، آنزیم آنتی اکسیدان، سوپر اکسیداز دیسموتاز، انکپسوله کردن، رهایش و پایداری در سیستم گوارشی

  

تحت نظارت وف ایرانی